Banca de DEFESA: SUZANNE NERY SERRATH

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SUZANNE NERY SERRATH
DATA : 24/04/2024
HORA: 08:30
LOCAL: Sala Virtual Remota - https://bit.ly/DefMSc_SuzanneSerrath_PGBIOEXP
TÍTULO:

ANÁLISE PROTEÔMICA DE EXOSSOMOS DE NEUTRÓFILOS HUMANOS ESTIMULADOS COM L-aminoácido oxidase (LAAO) ISOLADA DO VENENO DE Calloselasma rhodostoma.

PALAVRAS-CHAVES:

Cr-LAAO, vesícula extracelular, acidente ofídico, inflamação.

PÁGINAS: 84
RESUMO:

Os venenos animais são uma importante fonte de proteínas com alta adaptabilidade ao meio ambiente. Entre as proteínas encontra-se a L- aminoácido oxidase (LAAO) que tem sido estudada devido ao seu envolvimento em diversos efeitos fisiopatológicos como hemólise, edema, hemorragia, indução de apoptose, citotoxicidade, atividades microbicidas, efeitos sobre plaquetas e ativação de neutrófilos humanos. Os exossomos, nanovesículas celulares, desempenham papéis vitais na comunicação intercelular, incluindo respostas imunes e participam de alguns efeitos fisiopatológicos de caráter inflamatório, como o estresse oxidativo, que é a principal resposta da ativação de neutrófilos. Dessa forma, o estudo teve por objetivo investigar o impacto da LAAO isolada do veneno da serpente Calloselasma rhodostoma (Cr-LAAO) na liberação de exossomos de neutrófilos humanos, incluindo padrões de ativação, proteínas identificadas nas vesículas e suas vias de sinalização. Os neutrófilos humanos isolados foram incubados com RPMI (controle negativo), PMA (500 ng/mL controle positivo) e Cr-LAAO (100 μg/mL). A caracterização de tamanho foi realizada por difração dinâmica de luz utilizando sistema Zetasizer Nano ZS, (Instrument Mallvern®). Os exossomos foram analisados quanto aos marcadores de superfície utilizando Western Blot, detectando-se CD63 e CD81, proteínas características dessas estruturas. Através de proteômica por espectrometria de massa, identificaram-se as proteínas presentes nos exossomos. Ao analisar o sobrenadante de neutrófilos estimulados pela Cr-LAAO, constatou-se a presença de partículas com características de exossomos, variando em tamanho de 8 a 70 nm. A expressão dos marcadores CD63 e CD81 nos exossomos liberados por neutrófilos estimulados pela Cr-LAAO foi confirmada por Western Blot. Na análise proteômica dos exossomos, foram identificadas aproximadamente 722 proteínas em todos os grupos experimentais, revelando suas interações e envolvimento em processos biológicos, funções moleculares e componentes celulares. Esses resultados proporcionam uma compreensão aprimorada do papel da Cr-LAAO na ativação de neutrófilos humanos, resultando na liberação de exossomos e facilitando a comunicação intercelular. Além disso, fornecem informações cruciais para possíveis abordagens terapêuticas em distúrbios inflamatórios e imunológicos.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - BRUNA CAVECCI-MENDONÇA
Presidente - 1726461 - JULIANA PAVAN ZULIANI TRENCH DE SOUZA
Externa à Instituição - LUCIANA LYRA CASAIS E SILVA - UFBA