Banca de DEFESA: CLAUDIA SIQUEIRA DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : CLAUDIA SIQUEIRA DE OLIVEIRA
DATA : 19/03/2020
HORA: 09:00
LOCAL: programa de Biologia Experimental
TÍTULO:

Avaliação dos efeitos biológicos induzidos por extratos marinhos e investigação do potencial antimicrobiano de peptídeos sintéticos obtidos da fosfolipase A2 da anêmona Condylacts gigantea

PALAVRAS-CHAVES:

Palavras-chave: Invertebrado marinho, Condylactis gigantea, fosfolipase, antimicrobianos.

PÁGINAS: 90
RESUMO:

A resistência microbiana é um fenômeno desenvolvido por diversos microrganismos incluindo bactérias, fungos, vírus e parasitas, que acaba por resultar em terapias mais dispendiosas, prolongamento do tratamento e maior risco de morte. A situação é relatada em vários países do mundo sendo considerada como um problema de saúde pública global emergente, levando pesquisadores, médicos e profissionais da área a investir em alternativas para o desenvolvimento de novos fármacos. Nesse contexto, estudos envolvendo invertebrados marinhos, como fontes de moléculas bioativas contra microrganismos patogênicos é uma linha de pesquisa que tem ganhado destaque atualmente devido ao sucesso com os resultados obtidos. Dessa forma, este trabalho teve por objetivo, avaliar os efeitos biológicos induzidos por extratos da anêmona Condylactis gigantea (CgTotal e CgParede) e investigar o potencial antimicrobiano de peptídeos sintéticos obtidos da fosfolipase A2 denominada de CgPLA2. Os extratos foram avaliados in vitro, quanto a capacidade de produzir hemólise e clivar fosfolipídios fluorescentes e in vivo, quanto a capacidade de indução de edema e miotoxicidade. A citotoxicidade foi observada utilizando linhagens de células tumorais humanas Jurkat (leucemia T) e B16F10 (melanoma). E a investigação antimicrobiana foi realizada frente a cepas de E. faecalis (VanA), E. faecalis (Van-B), S. aureus (MRSA) e K. peneumonie multirresistente. A busca por epítopos na sequência de aminoácidos da CgPLA2 foi realizada por comparação de similaridade entre as sequências da fosfolipase e de peptídeos bioativos depositados em banco de dados. O extrato CgTotal foi fracionado por cromatografia de exclusão molecular, seguido de cromatografia de troca iônica e fase reversa em coluna C18. A atividade fosfolipásica da fração de interesse e molécula isolada foi identificada pela hidrolise do ácido 4N3OBA. Os resultados, mostraram que CgTotal não produziu hemólise, não apresentou atividade de fosfolipase frente ao substrato fluorescente, não demonstrou ser edematogênico, miotóxico ou citotóxico. CgParede, não produziu hemólise indireta, não apresentou atividade de fosfolipase, não produziu edema e miotoxicidade, e não foi citotóxico frente a célula B16F10, mas produziu hemólise direta e citotoxicidade sobre a célula Jurkat. O fracionamento foi eficiente para o isolamento de uma molécula ácida com atividade de fosfolipase. O rastreio por epítopos com atividade antimicrobiana a partir da sequência da CgPLA2 resultou em três peptídeos sintéticos que não apresentaram toxicidade frente as cepas bacterianas testadas. Os resultados obtidos com esse trabalho, demonstram que o extrato da anêmona C. gigantea pode ser um interessante objeto de estudo para explorar o potencial citotóxico sobre células tumorais. Os fragmentos da fosfolipase expressa nesse organismo, pode servir como inspiração para o desenho racional de peptídeos sintéticos para serem prospectados contra cepas bacterianas.

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 1530806 - ALEXANDRE DE ALMEIDA E SILVA
Externo à Instituição - CAROLINA BIONE GARCIA TELES - FIOCRUZ
Externo à Instituição - CESAR LUIZ DA SILVA GUIMARAES - FIOCRUZ
Presidente - 1522184 - LEONARDO DE AZEVEDO CALDERON
Externo ao Programa - 1523620 - RUBIANI DE CASSIA PAGOTTO