Banca de QUALIFICAÇÃO: SUZANNE NERY SERRATH

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SUZANNE NERY SERRATH
DATA : 13/12/2023
HORA: 08:00
LOCAL: Sala Virtual Remota https://bit.ly/Qualif_MSc_SuzanneNery_PGBIOEXP
TÍTULO:

ANÁLISE PROTEÔMICA DE EXOSSOMOS DE NEUTRÓFILOS HUMANOS ESTIMULADOS PELA L-AMINOÁCIDO OXIDASE ISOLADA DO VENENO DE Calloselasma rhodostoma

PALAVRAS-CHAVES:

Cr-LAAO, vesícula extracelular, veneno de serpente, inflamação.

PÁGINAS: 71
RESUMO:

Os venenos animais são uma importante fonte de proteínas com alta adaptabilidade ao meio ambiente. Entre as proteínas encontra-se a L- aminoácido oxidase (LAAO) que tem sido estudada devido ao seu envolvimento em diversos efeitos fisiopatológicos como hemólise, edema, hemorragia, indução de apoptose, citotoxicidade, atividades microbicidas, efeitos sobre plaquetas e ativação de neutrófilos humanos. Os exossomos, nanovesículas celulares, desempenham papéis vitais na comunicação intercelular, incluindo respostas imunes e participam de alguns efeitos fisiopatológicos de caráter inflamatório, como o estresse oxidativo, que é a principal resposta da ativação de neutrófilos. Dessa forma, o estudo teve por objetivo investigar o impacto da LAAO isolada do veneno da serpente Calloselasma rhodostoma (Cr-LAAO) na liberação de exossomos de neutrófilos humanos, incluindo padrões de ativação, proteínas identificadas nas vesículas e suas vias de sinalização. Os neutrófilos humanos isolados foram incubados com RPMI (controle negativo), PMA (500 ng/mL controle positivo) e Cr-LAAO (100 μg/mL). Após 3h de incubação, o sobrenadante foi coletado e os exossomos foram isolados por filtração seguido de ultracentrifugação a 100.000 x g por 3h. A caracterização de tamanho foi realizada por difração dinâmica de luz utilizando sistema Zetasizer Nano ZS, (Instrument Mallvern®). Os marcadores de superfícies dos exossomos foram caracterizados por Western Blot por meio da detecção de CD63 e CD81, proteínas características de exossomos. Os dados obtidos por meio da proteômica por espectrometria de massa possibilitaram a identificação de proteínas dos exossomos. A análise do sobrenadante dos neutrófilos estimulados pela Cr-LAAO demonstrou a presença de partículas equivalentes à exossomos, com tamanhos variando de 8 a 70 nm. Por meio de Western blot foi possível observar a expressão dos marcadores CD63 e CD81 nos exossomos liberados por neutrófilos estimulados pela Cr-LAAO. Na análise proteômica dos exossomos foi possível identificar cerca de 722 proteínas em todos os grupos experimentais e suas interações, e essas proteínas estão envolvidas em processos biológicos, funções moleculares e componentes celulares. Os resultados do presente estudo trouxeram uma melhor compreensão sobre o papel da Cr-LAAO na ativação de neutrófilos humanos, levando à liberação de exossomos e facilitando a comunicação intercelular, fornecendo informações importantes de possíveis abordagens terapêuticas para distúrbios inflamatórios e imunológicos.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - BRUNA CAVECCI-MENDONÇA
Externa à Instituição - LUCIANA LYRA CASAIS E SILVA - UFBA
Presidente - ***.482.422-** - NAJLA BENEVIDES MATOS - UNIR