AVALIAÇÃO DA INFLUÊNCIA DA PARASITEMIA SOBRE MARCADORES DE
ATIVAÇÃO PLAQUETÁRIA ANALISADA POR CITOMETRIA DE FLUXO EM
PACIENTES INFECTADOS POR PLASMODIUM VIVAX
Palavras Chaves: Plamodium vivax, ativação plaquetária, citometria de fluxo
A malária, ainda é uma das maiores causas de morbidade e mortalidade em
muitos países tropicais e subtropicais. O entendimento da patogênese associada à
malária por Plasmodium vivax tem sido um desafio nos últimos anos, o que torna
prioritário o estudo dos mecanismos patogênicos dessa espécie. Dado o caráter
inflamatório exibido pela malária vivax, torna-se relevante estudar a influência da
ativação plaquetária na gravidade da doença. Neste sentido, o presente trabalho
investigou os níveis de importantes proteínas de superfície plaquetária em pacientes
com malária aguda por Plasmodium vivax com diferentes graus de parasitemia. O
objetivo deste estudo foi padronizar as técnicas para avaliar a expressão de
marcadores de ativação plaquetária e aplica-las no estudo da malária, assim como
padronizar a técnica de titulação de anticorpos, onde foi possível obter a concentração
correta dos anticorpos que foram utilizados. Foram avaliados 11 indivíduos, dos quais
10 eram indivíduos infectados por Plasmodium vivax e um eram indivíduos não
infectados. Nesta etapa foram avaliados os biomarcadores αIIbβ3 porção αIIb –
CD41a), P-Selectina (CD62P). Foi analisado ainda a porcentagem do isolamento de
plaquetas de todos os indivíduos. Nos dois grupos (indivíduos infectados e não
infectados) foi observado a expressão da CD41a, representando uma média de 98,5%
o que é esperado uma vez, que esta é a primeira glicoproteína presente na superfície.
Com relação a expressão da P-Selectina (CD62P), nos indivíduos doentes houve uma
baixa expressão da P-Selectina, variando numa porcentagem de 0.28 a 1.07. Quanto
ao isolamento de plaquetas, foi observado dentro do gate de plaquetas, uma média
de 97% de pureza desse isolamento. Um total de 50.000 eventos foram adquiridos
por tubo, usando o citômetro de fluxo Celesta® (Becton Dickinson). Para a aquisição
e análise dos dados foi utilizado o software Flowjo, conforme recomendação do
fabricante e finalmente a análise estatística apropriada será aplicada nos
experimentos futuros.